破坏性蛋白质提取的方法是细胞壁蛋白提取的第二个主要途径,并且这个方法也应用了质壁分离。在用含有甘油和甘露醇的溶液处理拟南芥的悬浮细胞系后,将细胞通过一个N2破碎弹随后细胞碎片被恢复并且通过显微镜检查。从准备的细胞壁材料中用2%的十二烷基硫酸钠(SDS)提取蛋白质并用Western杂交分析污染的胞内蛋白。作为非破坏性的方法,污染是一个重大的问题,因此必须保证细胞壁的纯度。
评分正版书,很不错,对生物专业有用
评分正如所有的亚细胞的蛋白质组学研究,提取细胞壁蛋白质组的关键因素是提取的蛋白质片段不能被来自细胞其他部位的蛋白质污染。通常情况下用两种方法来分离细胞壁细胞壁的蛋白质。非破裂和破裂蛋白质提取两种方法各自有其优缺点,特别是有关蛋白质污染和改进当前的提取方法。第二个重要方面是多糖多酚类污染物的清除,它们在双向电泳中产生不良作用。过去,细胞培养为细胞壁蛋白质的提取提供了均一并且相对“干净”的组织来源。虽然分化的组织在生物学研究上相关性更强,但是研究起来更加复杂和困难,目前对于这些组织的大规模的蛋白质组的成果相对比较新。本章简单总结现有细胞壁蛋白质提取方法并且描述一种从紫花苜蓿茎中提取细胞壁蛋白质的具体方法。
评分正如所有的亚细胞的蛋白质组学研究,提取细胞壁蛋白质组的关键因素是提取的蛋白质片段不能被来自细胞其他部位的蛋白质污染。通常情况下用两种方法来分离细胞壁细胞壁的蛋白质。非破裂和破裂蛋白质提取两种方法各自有其优缺点,特别是有关蛋白质污染和改进当前的提取方法。第二个重要方面是多糖多酚类污染物的清除,它们在双向电泳中产生不良作用。过去,细胞培养为细胞壁蛋白质的提取提供了均一并且相对“干净”的组织来源。虽然分化的组织在生物学研究上相关性更强,但是研究起来更加复杂和困难,目前对于这些组织的大规模的蛋白质组的成果相对比较新。本章简单总结现有细胞壁蛋白质提取方法并且描述一种从紫花苜蓿茎中提取细胞壁蛋白质的具体方法。
评分生命科学实验指南系列:植物蛋白质组学实验指南 很详细的实验
评分在同一组发表的两篇文献中拟南芥悬浮细胞的匀浆液也被用来作为一个细胞壁蛋白质的来源[12,13]。在这两种情况下,细胞洗涤、过滤,并通过细胞破坏器。这些匀浆在甘油溶液中被分层并且通过重力沉淀后细胞壁组分被收集和洗涤。纯化的细胞壁由电子显微镜检查并且通过免疫荧光和免疫杂交检测污染的胞内或膜蛋白[12]。结果支持了作者的结论:细胞壁组分没有污染的蛋白质。在这两个文件中,细胞壁组分中的蛋白质先用0.2mol/L氯化钙提取然后用尿素缓冲液。
评分沈世华,中国科学院植物研究所研究员,博士生导师。兼任中国科学院唐山高新技术研发与转化中心工程植物事业部部长,中国植物生理学会植物生物质与生物能源专业委员会委员。
评分 评分本站所有内容均为互联网搜索引擎提供的公开搜索信息,本站不存储任何数据与内容,任何内容与数据均与本站无关,如有需要请联系相关搜索引擎包括但不限于百度,google,bing,sogou 等
© 2025 book.qciss.net All Rights Reserved. 图书大百科 版权所有