组织学与胚胎学实验指导与图学练习 pdf epub mobi txt 电子书 下载 在线阅读 2026

基本信息

书名:组织学与胚胎学实验指导与图学练习

定价：35.00元

售价：24.5元,便宜10.5元,折扣70

作者:柳洁

出版社：科学出版社

出版日期：2016-02-01

ISBN：9787030252784

字数：214

页码：

版次：1

装帧：平装

开本：16

商品重量：0.241kg

编辑推荐

内容提要

内容主要包括实验指导与习题集两部分。实验指导共分十六章，包括绪论、上皮组织、结缔组织、肌肉组织、神经组织、循环系统、免疫系统、内分泌系统、消化管、消化腺、呼吸系统、泌尿系统、男性生殖系统、女性生殖系统、皮肤、眼与耳及人体胚胎早期发育等，每章均附有实训练习；习题集共有习题600余道，后附标准答案。

目录

作者介绍

文摘

序言

《分子生物学技术及其应用》 本书简介 本书旨在为生命科学领域的科研工作者、研究生以及高年级本科生提供一本全面、深入且具有高度实践指导意义的分子生物学实验技术参考手册。在当前生物医学研究飞速发展的背景下，掌握扎实且前沿的分子生物学技术是进行创新性研究的基础。本书严格遵循理论与实践相结合的原则，系统地梳理了分子生物学领域的核心技术体系，并针对每项技术的操作细节、原理阐释、常见问题分析及高级应用拓展进行了详尽的论述。 第一部分：基础分子生物学工具箱 本部分聚焦于分子生物学研究中不可或缺的基石性技术，为后续复杂实验打下坚实的基础。 第一章：核酸的提取与纯化 详细阐述了从不同来源（如血液、组织、细胞培养物、植物组织、微生物等）高效提取和纯化DNA、RNA的各种方法。内容涵盖传统的酚-氯仿抽提法、基于硅胶膜的柱式纯化技术、磁珠法等。重点分析了影响核酸质量和产量的关键因素，如裂解效率、蛋白酶K的活性控制、RNase污染的预防措施，以及如何对提取的核酸进行定量（如NanoDrop、Qubit）和定性评估（如琼脂糖凝胶电泳）。对于RNA提取，特别强调了高质量高完整性RNA（RIN值）的重要性及其检测方法。 第二章：聚合酶链式反应（PCR）及其变体 本章深入剖析了PCR技术的理论基础，包括引物设计原则（Tm值计算、二级结构预测、特异性校验）、酶的选择（热启动酶、高保真酶）和反应条件优化。详细介绍了PCR的各种重要变体： 1. 实时荧光定量PCR（qPCR/RT-qPCR）： 阐述了荧光染料法（SYBR Green）和荧光探针法（TaqMan、Molecular Beacon）的工作原理，重点讲解了标准曲线的建立、溶解曲线分析、内参基因的选择与验证，以及绝对定量和相对定量的计算流程。 2. 反转录PCR（RT-PCR）： 区分了单管法（One-Step）和两步法（Two-Step）的适用场景，并讨论了cDNA合成的最佳条件。 3. 高保真PCR和长片段PCR： 介绍了如何利用特殊的DNA聚合酶和优化体系以获得更高准确度的扩增产物或扩增更长的DNA片段。 第三章：凝胶电泳与印迹技术 本章详细介绍了琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）在核酸和蛋白质分离中的应用。对于DNA/RNA电泳，讨论了不同浓度凝胶的选择、分子量标准品的应用及图像分析。对于蛋白质电泳（SDS-PAGE），详细描述了样品制备、上样、电泳过程控制及胶回收技术。 在此基础上，重点阐述了核酸和蛋白质印迹技术： 1. Southern Blotting 与 Northern Blotting： 涵盖了从转移（湿转、半干转）、探针设计（放射性与非放射性标记）、杂交条件（温度、盐浓度）到显影的全流程，用于检测特定序列的DNA或RNA。 2. Western Blotting： 详细介绍了抗体的选择与优化（一抗、二抗）、封闭液的配制、洗涤步骤的严格控制以及化学发光和荧光检测系统的应用，是蛋白质定性和定性分析的核心技术。 第二部分：基因克隆与重组技术 本部分专注于分子生物学研究中构建和操作遗传物质的核心技术。 第四章：限制性内切酶与连接反应 详述了限制性内切酶的识别序列、切割类型（平末端、粘性末端）及其在基因工程中的应用。详细介绍了DNA片段的纯化（凝胶切胶回收、PCR产物纯化）。深入讲解了连接反应的原理，包括T4 DNA连接酶的活性调控、连接效率的优化（如载体与插入片段的摩尔比），并对比了传统粘性末端连接、平末端连接以及与载体系统兼容的先进连接技术（如Gibson Assembly）。 第五章：载体构建与转化 系统介绍了各种分子克隆载体的类型及其用途，包括质粒载体（如pUC系列、表达载体）、噬菌体载体、病毒载体（腺病毒、慢病毒）以及酵母人工染色体（YAC）。 重点讲解了基因导入技术： 1. 细菌转化： 详细描述了感受态细胞的制备（热激法、电击法）和转化效率的计算。 2. 哺乳动物细胞转染： 深入对比了化学法（脂质体）、物理法（电穿孔、微注射）和病毒感染法的优缺点、操作流程与优化策略，并强调了瞬时转染与稳定细胞株建立的区别。 第六章：定向突变与基因编辑技术 本章聚焦于精确修改遗传信息的现代方法： 1. 定点突变技术（Site-Directed Mutagenesis）： 详细介绍了基于PCR的Kunkel法、Stratagene法以及基于环状DNA的快速突变技术，用于精确引入点突变、缺失或插入。 2. CRISPR/Cas9 基因编辑系统： 提供了CRISPR/Cas9系统的结构解析、gRNA的设计原则（脱靶效应评估）、递送策略（质粒、mRNA、RNP）以及后续的鉴定方法（T7E1实验、Sanger测序、二代测序）。同时涵盖了碱基编辑和先导编辑等前沿技术的原理简介。 第三部分：高级应用与整合技术 本部分拓展至需要多项技术整合的高级研究领域。 第七章：基因表达调控研究技术 探讨如何通过分子手段研究基因的转录和翻译调控： 1. 启动子/增强子活性分析： 详细介绍了报告基因实验（如荧光素酶报告系统、Chloramphenicol Acetyltransferase, CAT）的设计与数据解读。 2. ChIP（染色质免疫沉淀）技术： 全面介绍了ChIP-qPCR和ChIP-Seq的实验流程，包括交联条件、免疫沉淀的优化、DNA的纯化和下游高通量测序分析的注意事项，用于研究蛋白质与DNA的相互作用。 3. RNA干扰（RNAi）技术： 比较了siRNA、shRNA和miRNA的作用机制，详细指导了siRNA的靶点设计、干扰效率的评估以及对细胞表型的影响分析。 第八章：下一代测序（NGS）文库构建与数据分析导论 本章提供NGS实验的入门指导，重点在于文库的制备： 1. RNA-Seq与DNA测序文库： 详细描述了从总RNA或基因组DNA到双链cDNA的制备过程，片段化、接头（Adapter）的连接、质量控制（Agilent Bioanalyzer）和富集步骤。 2. 外显子组测序与宏基因组测序的特殊要求。 3. 数据初筛： 简要介绍了测序数据（FASTQ文件）的质量评估工具（如FastQC）和比对流程的概念，强调了数据分析在实验设计阶段的重要性。 第九章：蛋白质相互作用研究技术 阐述研究蛋白质复合体和信号通路的关键方法： 1. 酵母双杂交（Y2H）： 详细描述了正向和负向筛选体系的建立，以及如何避免假阳性结果。 2. Co-IP与Pull-Down实验： 详述了抗体亲和层析的优化、洗脱条件的设定、以及后续的Western Blot鉴定或质谱分析（Co-IP/MS）的准备工作。 本书力求以详尽的步骤、清晰的图示（涉及实验流程图和仪器操作示意图）以及针对性的故障排除指南，成为分子生物学实验工作者的得力助手。