書名:生物實驗室係列--細胞生物學實驗技術(二版)
定價:49元
作者:章靜波
齣版社:化學工業齣版社
齣版日期:2011-08-01
ISBN:9787122113559
字數:
頁碼:
版次:2
裝幀:平裝
開本:12k
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第一章 顯微鏡技術 基本方案1 普通顯微鏡的構造及使用方法 基本方案2 相差顯微鏡的構造及使用方法 基本方案3 熒光顯微鏡的構造及使用方法 基本方案4 透射電子顯微鏡與超薄切片技術 基本方案5 掃描電子顯微鏡與樣品製備 備擇方案1 激光掃描共聚焦顯微鏡的構造及使用方法 備擇方案2 激光捕獲顯微切割技術 支持方案顯微攝影技術 第二章 組織學基本技術 基本方案1 石蠟切片技術 基本方案2 冰凍切片技術 基本方案3 蘇木素�慘梁歟╤ematoxylin�瞖osinstain,HE)染色技術 備擇方案1 吉姆薩(Giemsa)染色技術 備擇方案2 組織學切片的Feulgen染色技術 備擇方案3 中性脂肪油紅O顯示(Oil red O stain)技術 備擇方案4 組織切片的堿性磷酸酶染色技術(ALP鈣�差芊ǎ� 備擇方案5 組織切片的琥珀酸脫氫酶染色(SDH stain)技術 備擇方案6 組織切片的核酸甲苯胺藍顯示技術 第三章 細胞結構與成分的顯示技術 基本方案1 細胞中DNA和RNA的顯示 基本方案2 細胞中過氧化物酶的顯示 基本方案3 細胞中堿性蛋白的顯示 基本方案4 一氧化氮閤酶的顯示 基本方案5 細胞中綫粒體的活體染色 基本方案6 細胞中糖類和脂類的顯示 基本方案7 酸性磷酸酶的顯示 備擇方案1 細胞中液泡係的活體染色 備擇方案2 培養細胞完整生物膜係統的觀察 備擇方案3 微絲的染色及形態觀察 支持方案間接免疫熒光技術顯示胞質微管 第四章 細胞生理實驗 基本方案1 細胞的運動 基本方案2 細胞的吞噬活動 基本方案3 細胞自噬檢測方法 備擇方案細胞膜通透性的測定 第五章 細胞培養和分析 基本方案1 細胞的原代培養 基本方案2 培養細胞的形態觀察和計數 基本方案3 培養細胞生長麯綫的繪製和分裂指數的測定 基本方案4 細胞集落形成實驗 基本方案5 器官培養方法 基本方案6 雞胚尿囊培養法 備擇方案1 細胞的傳代培養 備擇方案2 MTT對細胞生長狀況的檢測 備擇方案3 錶皮細胞的培養 備擇方案4 骨骼肌細胞的培養 備擇方案5 內皮細胞的培養 備擇方案6 神經膠質細胞的培養 備擇方案7 骨髓間充質乾細胞的培養及其體外誘導分化 支持方案1 細胞的凍存與復蘇 支持方案2 細胞顯微測量技術 支持方案3 細胞培養中支原體汙染的檢測 支持方案4 放射自顯影術及同位素液閃測定 第六章 乾細胞培養及誘導分化 基本方案1 人胚胎乾細胞傳代培養 基本方案2 人胚胎乾細胞的誘導分化 基本方案3 腫瘤乾細胞的分離純化 備擇方案誘導多潛能乾細胞 支持方案小鼠胚胎成縴維細胞(MEF) 的分離及飼養層的製備 第七章 細胞周期分析 基本方案流式細胞儀檢測細胞周期 備擇方案1 細胞同步化實驗 備擇方案2 通過分析CDK的活性檢測細胞周期 第八章 細胞成分的分離與分析 基本方案1 差速離心法分離細胞和細胞器 基本方案2 密度梯度離心法分離細胞組分 基本方案3 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質 基本方案4 Western印跡技術 備擇方案免疫沉澱法 支持方案蛋白質的雙嚮聚丙烯酰胺凝膠電泳 第九章 細胞工程基礎技術 基本方案1 細胞融閤實驗 基本方案2 單剋隆抗體的製備 備擇方案1 染色體提前凝集標本的製備 備擇方案2 顯微注射技術(核移植) 備擇方案3 DNA轉染實驗(綠色熒光蛋白) 支持方案體外受精技術 第十章 細胞凋亡的測定 基本方案1 凋亡細胞的普通光鏡觀察 基本方案2 凋亡細胞的熒光顯微鏡觀察 基本方案3 凋亡細胞的瓊脂糖凝膠電泳檢測——DNA梯狀條帶(DNA ladder) 備擇方案1 凋亡細胞的電鏡觀察 備擇方案2 凋亡細胞的原位末端標記法檢測 備擇方案3 凋亡細胞的單細胞電泳檢測 備擇方案4 凋亡細胞的流式細胞法檢測 支持方案磷酸酰絲氨酸外化的流式細胞術分析 第十一章 染色體技術 基本方案1 染色體標本製備 基本方案2 端粒及端粒酶顯示技術 備擇方案1 染色體顯帶技術 備擇方案2 性染色質的製備 備擇方案3 姐妹染色單體交換實驗 備擇方案4 染色體原位雜交技術 支持方案染色體實驗試劑配製 第十二章 分子細胞生物學技術 基本方案1 DNA提取及檢測 基本方案2 RNA提取及檢測 基本方案3 Southern印跡技術 基本方案4 Northern印跡技術 基本方案5 RNA乾擾技術 基本方案6 酵母雙雜交技術 備擇方案1 RT�睵CR 備擇方案2 原位PCR技術 備擇方案3 熒光定量PCR技術 備擇方案4 基因芯片技術 備擇方案5 原位缺口平移技術 備擇方案6 染色質免疫沉澱法 備擇方案7 昆蟲杆狀病毒錶達係統 備擇方案8 GST pull�瞕own分析 參考文獻
為瞭跟上學科的發展,適應發展的需要,作者對《細胞生物學實驗技術》進行修訂更新,推齣第二版,新版適閤大多數院校(普通高等學校及醫院校)研究生與本科生學習細胞生物學技術的需要。特點在於: 基礎訓練為主,同時增加*而又不難掌握與瞭解的技術。本版中除瞭保留原有大部分內容之外,根據反饋意見增加瞭作為生物學與醫學研究基本手段的組織學切片技術,也不失時宜地補充瞭多種乾細胞培養的培養方法、鑒定及運用,其中括誘導多潛能乾細胞(iPScells)和腫瘤乾細胞培養、細胞自噬、端粒與端粒酶顯示技術、酵母雙雜交技術、昆蟲杆狀病毒錶達係統等。 本版也嘗試采用如同《精編細胞生物學實驗指南》(ShodProtocols in CellBiology,edJSBonifacino,etal,byJohnWiley&Sonslnc;.)那樣將所介紹的方法分為基本方案、備擇方案和支持方案3類。基本方案是指總體推薦或是普遍應用的方法,也是使用者應力求掌握的方法。備擇方案乃針對采用不同設備和而達到相同結果時可選用者,或許可以認為它是基本方案的一種補充與佐證。支持方案所描述的是進行基本方案或備擇方案所需要的那些附加步驟,這些步驟獨立於核心方案,它們或許也可以在其他實驗中用到。 本書可以作為相關高等院校的本科教材,也可供從事細胞生物學研究工作的人員閱讀參考。 讀者對象:本書可以作為相關高等院校的本科教材,也可供從事細胞生物學研究工作的人員閱讀參考。
文摘
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《現代生物技術前沿與實踐》 內容提要: 本書旨在為高等院校生物科學、生物技術及相關專業的本科生和研究生提供一個全麵、深入且與時俱進的現代生物技術概覽。本書摒棄瞭傳統教材中對基礎實驗技術的冗餘描述,轉而聚焦於當前生物技術領域最熱門、最具顛覆性的前沿技術及其在生命科學研究和産業化中的實際應用。全書內容緊密圍繞生命科學的重大挑戰與機遇展開,涵蓋瞭從基因組編輯到蛋白質工程,再到閤成生物學的廣闊圖景。 第一篇:基因組學與分子編輯的革命 本篇著重探討瞭高通量測序技術(NGS)的最新發展及其在個體化醫療、宏基因組學分析中的突破。 第三章:第三代與第四代測序技術深度解析: 詳細闡述瞭PacBio SMRT測序和Oxford Nanopore(納米孔)技術的工作原理、數據分析流程及在長讀長基因組組裝中的優勢。重點分析瞭如何利用這些技術解決復雜基因組(如多倍體植物、腫瘤異質性基因組)的組裝難題。 第四章:CRISPR-Cas係統的進化與精準調控: 不僅涵蓋瞭經典的Cas9係統,更深入介紹瞭近年來開發的堿基編輯器(Base Editors)、先導編輯器(Prime Editors)和CRISPR乾擾/激活係統(CRISPRi/a)。內容包括這些工具在非模式生物中的應用策略、脫靶效應的評估與抑製技術,以及如何設計更安全、高效的體內遞送係統(如腺相關病毒載體和脂質納米粒)。 第五章:單細胞多組學集成分析: 詳述瞭單細胞RNA測序(scRNA-seq)、單細胞ATAC測序(scATAC-seq)以及最新的單細胞蛋白質組學技術。重點介紹如何通過整閤多模態單細胞數據,解析細胞命運決定、組織微環境的動態變化,並利用計算工具(如Seurat, Scanpy)進行細胞類型注釋和軌跡推斷。 第二篇:蛋白質工程與生物製藥的工業化 本篇側重於如何利用現代生物技術手段對蛋白質進行理性設計、高效錶達與結構解析,以推動生物製藥和新型材料的開發。 第八章:高通量篩選技術在抗體工程中的應用: 詳細介紹瞭噬菌體展示技術、酵母展示係統及核酸偶聯係統(NCS)在發現高親和力、高特異性單剋隆抗體中的應用。探討瞭雙特異性抗體(BsAb)和抗體藥物偶聯物(ADC)的設計原則與偶聯化學。 第十章:結構生物學的跨越式發展: 重點介紹冷凍電鏡(Cryo-EM)單顆粒分析技術在解析大型蛋白質復閤物(如膜蛋白、核糖體)結構中的突破。闡述瞭如何結閤分子動力學模擬,利用結構信息指導蛋白質功能優化和藥物設計。 第十一章:非天然氨基酸的整閤與蛋白質功能化: 講解瞭遺傳密碼子的重新編碼(Recoding)技術,實現將具有特定官能團的非天然氨基酸(ncAAs)精確摻入到目標蛋白質中,從而賦予蛋白質新的化學反應活性或熒光特性。 第三篇:閤成生物學與係統生物學的交叉前沿 本篇探索如何將工程學的思維應用於生物係統,構建具有特定功能的新型生物元件、途徑和細胞。 第十三章:基因綫路設計與動態係統構建: 深入分析瞭反饋迴路、振蕩器、邏輯門等基本基因綫路的數學建模與在哺乳動物細胞中的實現。重點討論瞭如何通過調控轉錄因子和信號通路,實現細胞行為的精確編程,例如用於腫瘤靶嚮治療的“智能”細胞。 第十四章:微生物細胞工廠的代謝工程: 聚焦於利用基因組編輯和代謝網絡分析技術,改造微生物(如大腸杆菌、釀酒酵母)以高效生産高價值化學品(如生物燃料、特種營養素、新型抗生素)。內容包括異源代謝途徑的構建和宿主菌株的性能優化。 第十五章:從係統到生態:宏基因組驅動的生物製造: 探討如何利用環境樣本中提取的宏基因組數據,挖掘具有潛在工業價值的全新酶和代謝途徑。介紹如何將這些“環境基因組”快速剋隆並集成到工程菌株中進行功能驗證與放大生産。 第四篇:生物技術在健康與環境中的應用實踐 本篇將前沿技術與實際應用場景緊密結閤,展示生物技術解決現實問題的能力。 第十七章:類器官技術與疾病模型構建: 詳述瞭多能乾細胞(iPSCs)誘導分化為三維類器官(Organoids)的技術細節,包括腸道、腦、肝髒類器官的培養條件和微環境模擬。重點討論其在藥物篩選、疾病機製研究及未來器官再生醫學中的潛力與挑戰。 第十八章:生物信息學驅動的精準診斷: 涵蓋液體活檢(Liquid Biopsy)技術,特彆是循環腫瘤DNA(ctDNA)和循環腫瘤細胞(CTC)的捕獲、富集與分析。討論如何結閤高靈敏度的分子診斷技術,實現癌癥的早期篩查和治療反應的實時監測。 第十九章:環境生物修復與生物傳感器: 介紹利用工程微生物降解環境汙染物(如塑料、重金屬)的最新策略。同時,闡述如何設計基於熒光報告基因或電化學信號的生物傳感器,用於實時、高靈敏度地監測水質、土壤或食品中的毒素和病原體。 本書特色: 本書的編寫秉持“技術驅動未來,實踐引領創新”的理念。每章節末均設置“前沿案例分析”和“未來展望與倫理討論”環節,引導學生思考技術背後的科學深度、工程挑戰以及社會責任。本書的配圖和流程圖均采用最新的、高度信息化的示意圖,以幫助讀者快速掌握復雜的技術流程。本書的重點在於理解技術背後的核心科學原理、掌握如何選擇閤適的工具應對特定科學問題,並具備將技術轉化為實際應用的能力,而非僅僅是羅列標準操作程序。本書適閤有一定分子生物學和生物化學基礎的高年級本科生及研究生使用,是邁嚮生物技術研發領域的重要橋梁。
深入淺齣,層層遞進的敘事結構,極大地提升瞭學習效率 這本書的編排邏輯堪稱一絕。它沒有一開始就拋齣那些令人眼花繚亂的專業術語和復雜的流程圖,而是從細胞生物學的基本概念和安全規範入手,循序漸進地引導讀者進入核心實驗技術的世界。這種“搭颱子”的方式非常適閤本科生的認知習慣。每一章節的內容組織都非常嚴謹,先是清晰地闡述瞭某項技術背後的科學原理,為什麼需要這樣做,而不是那樣做;接著纔是詳細的操作步驟和試劑準備。更值得稱贊的是,它還設置瞭“常見問題與故障排除”的欄目,這簡直是實戰手冊級彆的配置。在學習細胞計數和活率測定這一部分時,我發現書中的建議對於如何避免氣泡乾擾、如何準確識彆死亡細胞,提供瞭非常具體的建議。這讓我在預習時就能預判到實驗中的難點,提前做好心理準備和技術儲備,極大地提高瞭我的學習效率,也避免瞭實驗失敗帶來的挫敗感。這本書的價值遠超一本單純的教科書,它更像是一位經驗豐富的導師在身邊耳提麵命。