书名:生物实验室系列--细胞生物学实验技术(二版)
定价:49元
作者:章静波
出版社:化学工业出版社
出版日期:2011-08-01
ISBN:9787122113559
字数:
页码:
版次:2
装帧:平装
开本:12k
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第一章 显微镜技术 基本方案1 普通显微镜的构造及使用方法 基本方案2 相差显微镜的构造及使用方法 基本方案3 荧光显微镜的构造及使用方法 基本方案4 透射电子显微镜与超薄切片技术 基本方案5 扫描电子显微镜与样品制备 备择方案1 激光扫描共聚焦显微镜的构造及使用方法 备择方案2 激光捕获显微切割技术 支持方案显微摄影技术 第二章 组织学基本技术 基本方案1 石蜡切片技术 基本方案2 冰冻切片技术 基本方案3 苏木素�惨梁欤╤ematoxylin�瞖osinstain,HE)染色技术 备择方案1 吉姆萨(Giemsa)染色技术 备择方案2 组织学切片的Feulgen染色技术 备择方案3 中性脂肪油红O显示(Oil red O stain)技术 备择方案4 组织切片的碱性磷酸酶染色技术(ALP钙�差芊ǎ� 备择方案5 组织切片的琥珀酸脱氢酶染色(SDH stain)技术 备择方案6 组织切片的核酸甲苯胺蓝显示技术 第三章 细胞结构与成分的显示技术 基本方案1 细胞中DNA和RNA的显示 基本方案2 细胞中过氧化物酶的显示 基本方案3 细胞中碱性蛋白的显示 基本方案4 一氧化氮合酶的显示 基本方案5 细胞中线粒体的活体染色 基本方案6 细胞中糖类和脂类的显示 基本方案7 酸性磷酸酶的显示 备择方案1 细胞中液泡系的活体染色 备择方案2 培养细胞完整生物膜系统的观察 备择方案3 微丝的染色及形态观察 支持方案间接免疫荧光技术显示胞质微管 第四章 细胞生理实验 基本方案1 细胞的运动 基本方案2 细胞的吞噬活动 基本方案3 细胞自噬检测方法 备择方案细胞膜通透性的测定 第五章 细胞培养和分析 基本方案1 细胞的原代培养 基本方案2 培养细胞的形态观察和计数 基本方案3 培养细胞生长曲线的绘制和分裂指数的测定 基本方案4 细胞集落形成实验 基本方案5 器官培养方法 基本方案6 鸡胚尿囊培养法 备择方案1 细胞的传代培养 备择方案2 MTT对细胞生长状况的检测 备择方案3 表皮细胞的培养 备择方案4 骨骼肌细胞的培养 备择方案5 内皮细胞的培养 备择方案6 神经胶质细胞的培养 备择方案7 骨髓间充质干细胞的培养及其体外诱导分化 支持方案1 细胞的冻存与复苏 支持方案2 细胞显微测量技术 支持方案3 细胞培养中支原体污染的检测 支持方案4 放射自显影术及同位素液闪测定 第六章 干细胞培养及诱导分化 基本方案1 人胚胎干细胞传代培养 基本方案2 人胚胎干细胞的诱导分化 基本方案3 肿瘤干细胞的分离纯化 备择方案诱导多潜能干细胞 支持方案小鼠胚胎成纤维细胞(MEF) 的分离及饲养层的制备 第七章 细胞周期分析 基本方案流式细胞仪检测细胞周期 备择方案1 细胞同步化实验 备择方案2 通过分析CDK的活性检测细胞周期 第八章 细胞成分的分离与分析 基本方案1 差速离心法分离细胞和细胞器 基本方案2 密度梯度离心法分离细胞组分 基本方案3 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质 基本方案4 Western印迹技术 备择方案免疫沉淀法 支持方案蛋白质的双向聚丙烯酰胺凝胶电泳 第九章 细胞工程基础技术 基本方案1 细胞融合实验 基本方案2 单克隆抗体的制备 备择方案1 染色体提前凝集标本的制备 备择方案2 显微注射技术(核移植) 备择方案3 DNA转染实验(绿色荧光蛋白) 支持方案体外受精技术 第十章 细胞凋亡的测定 基本方案1 凋亡细胞的普通光镜观察 基本方案2 凋亡细胞的荧光显微镜观察 基本方案3 凋亡细胞的琼脂糖凝胶电泳检测——DNA梯状条带(DNA ladder) 备择方案1 凋亡细胞的电镜观察 备择方案2 凋亡细胞的原位末端标记法检测 备择方案3 凋亡细胞的单细胞电泳检测 备择方案4 凋亡细胞的流式细胞法检测 支持方案磷酸酰丝氨酸外化的流式细胞术分析 第十一章 染色体技术 基本方案1 染色体标本制备 基本方案2 端粒及端粒酶显示技术 备择方案1 染色体显带技术 备择方案2 性染色质的制备 备择方案3 姐妹染色单体交换实验 备择方案4 染色体原位杂交技术 支持方案染色体实验试剂配制 第十二章 分子细胞生物学技术 基本方案1 DNA提取及检测 基本方案2 RNA提取及检测 基本方案3 Southern印迹技术 基本方案4 Northern印迹技术 基本方案5 RNA干扰技术 基本方案6 酵母双杂交技术 备择方案1 RT�睵CR 备择方案2 原位PCR技术 备择方案3 荧光定量PCR技术 备择方案4 基因芯片技术 备择方案5 原位缺口平移技术 备择方案6 染色质免疫沉淀法 备择方案7 昆虫杆状病毒表达系统 备择方案8 GST pull�瞕own分析 参考文献
为了跟上学科的发展,适应发展的需要,作者对《细胞生物学实验技术》进行修订更新,推出第二版,新版适合大多数院校(普通高等学校及医院校)研究生与本科生学习细胞生物学技术的需要。特点在于: 基础训练为主,同时增加*而又不难掌握与了解的技术。本版中除了保留原有大部分内容之外,根据反馈意见增加了作为生物学与医学研究基本手段的组织学切片技术,也不失时宜地补充了多种干细胞培养的培养方法、鉴定及运用,其中括诱导多潜能干细胞(iPScells)和肿瘤干细胞培养、细胞自噬、端粒与端粒酶显示技术、酵母双杂交技术、昆虫杆状病毒表达系统等。 本版也尝试采用如同《精编细胞生物学实验指南》(ShodProtocols in CellBiology,edJSBonifacino,etal,byJohnWiley&Sonslnc;.)那样将所介绍的方法分为基本方案、备择方案和支持方案3类。基本方案是指总体推荐或是普遍应用的方法,也是使用者应力求掌握的方法。备择方案乃针对采用不同设备和而达到相同结果时可选用者,或许可以认为它是基本方案的一种补充与佐证。支持方案所描述的是进行基本方案或备择方案所需要的那些附加步骤,这些步骤独立于核心方案,它们或许也可以在其他实验中用到。 本书可以作为相关高等院校的本科教材,也可供从事细胞生物学研究工作的人员阅读参考。 读者对象:本书可以作为相关高等院校的本科教材,也可供从事细胞生物学研究工作的人员阅读参考。
文摘
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《现代生物技术前沿与实践》 内容提要: 本书旨在为高等院校生物科学、生物技术及相关专业的本科生和研究生提供一个全面、深入且与时俱进的现代生物技术概览。本书摒弃了传统教材中对基础实验技术的冗余描述,转而聚焦于当前生物技术领域最热门、最具颠覆性的前沿技术及其在生命科学研究和产业化中的实际应用。全书内容紧密围绕生命科学的重大挑战与机遇展开,涵盖了从基因组编辑到蛋白质工程,再到合成生物学的广阔图景。 第一篇:基因组学与分子编辑的革命 本篇着重探讨了高通量测序技术(NGS)的最新发展及其在个体化医疗、宏基因组学分析中的突破。 第三章:第三代与第四代测序技术深度解析: 详细阐述了PacBio SMRT测序和Oxford Nanopore(纳米孔)技术的工作原理、数据分析流程及在长读长基因组组装中的优势。重点分析了如何利用这些技术解决复杂基因组(如多倍体植物、肿瘤异质性基因组)的组装难题。 第四章:CRISPR-Cas系统的进化与精准调控: 不仅涵盖了经典的Cas9系统,更深入介绍了近年来开发的碱基编辑器(Base Editors)、先导编辑器(Prime Editors)和CRISPR干扰/激活系统(CRISPRi/a)。内容包括这些工具在非模式生物中的应用策略、脱靶效应的评估与抑制技术,以及如何设计更安全、高效的体内递送系统(如腺相关病毒载体和脂质纳米粒)。 第五章:单细胞多组学集成分析: 详述了单细胞RNA测序(scRNA-seq)、单细胞ATAC测序(scATAC-seq)以及最新的单细胞蛋白质组学技术。重点介绍如何通过整合多模态单细胞数据,解析细胞命运决定、组织微环境的动态变化,并利用计算工具(如Seurat, Scanpy)进行细胞类型注释和轨迹推断。 第二篇:蛋白质工程与生物制药的工业化 本篇侧重于如何利用现代生物技术手段对蛋白质进行理性设计、高效表达与结构解析,以推动生物制药和新型材料的开发。 第八章:高通量筛选技术在抗体工程中的应用: 详细介绍了噬菌体展示技术、酵母展示系统及核酸偶联系统(NCS)在发现高亲和力、高特异性单克隆抗体中的应用。探讨了双特异性抗体(BsAb)和抗体药物偶联物(ADC)的设计原则与偶联化学。 第十章:结构生物学的跨越式发展: 重点介绍冷冻电镜(Cryo-EM)单颗粒分析技术在解析大型蛋白质复合物(如膜蛋白、核糖体)结构中的突破。阐述了如何结合分子动力学模拟,利用结构信息指导蛋白质功能优化和药物设计。 第十一章:非天然氨基酸的整合与蛋白质功能化: 讲解了遗传密码子的重新编码(Recoding)技术,实现将具有特定官能团的非天然氨基酸(ncAAs)精确掺入到目标蛋白质中,从而赋予蛋白质新的化学反应活性或荧光特性。 第三篇:合成生物学与系统生物学的交叉前沿 本篇探索如何将工程学的思维应用于生物系统,构建具有特定功能的新型生物元件、途径和细胞。 第十三章:基因线路设计与动态系统构建: 深入分析了反馈回路、振荡器、逻辑门等基本基因线路的数学建模与在哺乳动物细胞中的实现。重点讨论了如何通过调控转录因子和信号通路,实现细胞行为的精确编程,例如用于肿瘤靶向治疗的“智能”细胞。 第十四章:微生物细胞工厂的代谢工程: 聚焦于利用基因组编辑和代谢网络分析技术,改造微生物(如大肠杆菌、酿酒酵母)以高效生产高价值化学品(如生物燃料、特种营养素、新型抗生素)。内容包括异源代谢途径的构建和宿主菌株的性能优化。 第十五章:从系统到生态:宏基因组驱动的生物制造: 探讨如何利用环境样本中提取的宏基因组数据,挖掘具有潜在工业价值的全新酶和代谢途径。介绍如何将这些“环境基因组”快速克隆并集成到工程菌株中进行功能验证与放大生产。 第四篇:生物技术在健康与环境中的应用实践 本篇将前沿技术与实际应用场景紧密结合,展示生物技术解决现实问题的能力。 第十七章:类器官技术与疾病模型构建: 详述了多能干细胞(iPSCs)诱导分化为三维类器官(Organoids)的技术细节,包括肠道、脑、肝脏类器官的培养条件和微环境模拟。重点讨论其在药物筛选、疾病机制研究及未来器官再生医学中的潜力与挑战。 第十八章:生物信息学驱动的精准诊断: 涵盖液体活检(Liquid Biopsy)技术,特别是循环肿瘤DNA(ctDNA)和循环肿瘤细胞(CTC)的捕获、富集与分析。讨论如何结合高灵敏度的分子诊断技术,实现癌症的早期筛查和治疗反应的实时监测。 第十九章:环境生物修复与生物传感器: 介绍利用工程微生物降解环境污染物(如塑料、重金属)的最新策略。同时,阐述如何设计基于荧光报告基因或电化学信号的生物传感器,用于实时、高灵敏度地监测水质、土壤或食品中的毒素和病原体。 本书特色: 本书的编写秉持“技术驱动未来,实践引领创新”的理念。每章节末均设置“前沿案例分析”和“未来展望与伦理讨论”环节,引导学生思考技术背后的科学深度、工程挑战以及社会责任。本书的配图和流程图均采用最新的、高度信息化的示意图,以帮助读者快速掌握复杂的技术流程。本书的重点在于理解技术背后的核心科学原理、掌握如何选择合适的工具应对特定科学问题,并具备将技术转化为实际应用的能力,而非仅仅是罗列标准操作程序。本书适合有一定分子生物学和生物化学基础的高年级本科生及研究生使用,是迈向生物技术研发领域的重要桥梁。
深入浅出,层层递进的叙事结构,极大地提升了学习效率 这本书的编排逻辑堪称一绝。它没有一开始就抛出那些令人眼花缭乱的专业术语和复杂的流程图,而是从细胞生物学的基本概念和安全规范入手,循序渐进地引导读者进入核心实验技术的世界。这种“搭台子”的方式非常适合本科生的认知习惯。每一章节的内容组织都非常严谨,先是清晰地阐述了某项技术背后的科学原理,为什么需要这样做,而不是那样做;接着才是详细的操作步骤和试剂准备。更值得称赞的是,它还设置了“常见问题与故障排除”的栏目,这简直是实战手册级别的配置。在学习细胞计数和活率测定这一部分时,我发现书中的建议对于如何避免气泡干扰、如何准确识别死亡细胞,提供了非常具体的建议。这让我在预习时就能预判到实验中的难点,提前做好心理准备和技术储备,极大地提高了我的学习效率,也避免了实验失败带来的挫败感。这本书的价值远超一本单纯的教科书,它更像是一位经验丰富的导师在身边耳提面命。