基本信息
| 商品名称: | 流式细胞术:原理、操作及应用(XX版) 畅销书籍 正版XX版 流式细胞术 原理、操作及应用 | 开本: | |
| 作者: | 陈朱波, 曹雪涛著 | 页数: | |
| 定价: | 68.00元 | 出版时间: | 2014-01-01 |
| ISBN号: | 9787030390974 | 印刷时间: | |
| 出版社: | 科学出版社 | 版次: | 5 |
| 商品类型: | | 印次: | |
插图目录内容提要流式细胞术——原理、操作及应用(第二版)主要介绍流式细胞术的原理、操作及应用,分为概述、流式细胞仪的原理、流式图、流式细胞术的基本操作与技巧、流式分析术的应用和流式分选术的应用6个部分。概述部分介绍基本概念和几款常见的流式细胞仪;原理部分具体介绍流式细胞仪的液流系统、光路系统、检测分析系统和分选系统;流式图部分主要介绍了流式通道、流式直方图、流式散点图和流式等高线图;操作部分介绍了样品制备、荧光素偶联抗体及标记、光电倍增管电压设定、对照设置、补偿调节、阈值设定、死细胞问题处理、分选模式选择、上样速度控制、分选设门原则、分选基本步骤等内容;流式分析术的应用部分具体介绍了流式细胞术在免疫学方面的应用,并且扩展到基础医学和生物学方面的应用;流式分选术的应用部分阐述了不同条件下流式分选的策略选择和注意事项,同时还介绍了各种干细胞包括肿瘤干细胞等的流式分选方法。
编辑推荐新定价链接:流式细胞术——原理、操作及应用(第二版)深入浅出,通俗易懂;操作的全面性;理论联系实践;加强了流式分选的相关内容。作者介绍曹雪涛,中工程院院士,现任中医学科学院院长、北京协和医学院校长。中免疫学会理事长,医学免疫学重点实验室主任,全军免疫与基因重点实验室主任,“长江计划”特聘教授,免疫学重点学科带头人,杰出青年科学基金获得者,973免疫学项目席科学,863计划医药生物技术领域专,自然科学基金免疫学重大项目和创新团队项目负责人,务院学位评议委员会学科评议组委员。
细胞分析的深层探索:现代生物学研究的前沿技术 导论:生命科学研究的基石 在当今生物医学和生命科学领域,对单个细胞进行精确、多维度的分析已成为推动基础研究和临床转化的核心驱动力。细胞是生命活动的基本单位,理解其异质性、功能状态以及在疾病发生发展中的角色,是破解复杂生物学难题的关键。本书旨在全面系统地介绍那些在细胞分析领域具有里程碑意义、且与流式细胞术原理和操作紧密相关但侧重于不同维度的分析技术。我们将深入探讨免疫学、分子生物学、肿瘤生物学以及细胞治疗等前沿领域中,如何利用先进的仪器和试剂来实现对细胞群体的精细分选、功能鉴定和分子标记。 本书的重点将放在那些能够提供高分辨率、高通量或高特异性信息的细胞分析策略上,这些技术与流式细胞术在数据整合和验证上构成互补关系。我们关注的是那些能够揭示细胞动态变化、空间分布或特定分子事件的实验方法学。 --- 第一部分:高分辨率成像与空间分析技术 现代细胞生物学研究越来越强调“情境化”分析,即理解细胞在组织或微环境中的位置和相互作用。本部分聚焦于那些能够提供细胞空间信息的先进成像技术。 第一章:荧光原位杂交(FISH)与免疫荧光(IF)的深度应用 尽管流式细胞术可以分析细胞内的分子表达,但它牺牲了细胞的空间信息。本章将详细阐述如何通过高分辨率的荧光显微技术来恢复这种空间上下文。 1. 超分辨率显微技术(Super-resolution Microscopy, SRM): 介绍STED、PALM/STORM等技术如何突破传统光学衍射极限,实现对分子结构和蛋白质聚集体的纳米级观察。重点讨论如何利用这些技术验证流式分析中观察到的膜蛋白或细胞内囊泡的精确定位和聚集状态。 2. 多重荧光免疫组织化学(mIF/IHC): 探讨使用多达数十种标记物对组织切片进行同步染色的策略。详细介绍色彩补偿(Color Compensation)在成像分析中的重要性,以及如何利用深度学习算法对高通量图像进行自动识别和定量分析,从而识别复杂的细胞微环境特征,例如肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)的浸润模式和与肿瘤细胞的接触关系。 3. 空间转录组学(Spatial Transcriptomics): 这是理解基因表达在组织内分布的革命性技术。我们将深入剖析该技术的工作原理,包括基于点的(如10x Visium)和基于位置的测序方法。重点讨论如何将空间转录组数据与流式细胞术得到的细胞群落特征进行关联,例如,确定特定转录因子表达谱的细胞群在组织中的实际分布。 --- 第二部分:高通量功能筛选与单细胞组学前沿 流式细胞术擅长多参数分析,但对于大规模的基因功能筛选或需要极高灵敏度的单一分子检测,其他技术提供了独特的优势。 第二章:单细胞转录组测序(scRNA-seq)的原理与数据解读 单细胞测序技术是当前生物学研究中最具颠覆性的工具之一,它能以前所未有的分辨率揭示细胞群体的异质性。 1. 微流控捕获技术: 详细解析3'端和5'端测序的原理,以及液滴微流控系统(如Droplet-based microfluidics)如何实现数万个细胞的独立文库制备。 2. 数据处理与生物信息学: 重点介绍降维(PCA, t-SNE, UMAP)、聚类算法(Clustering)的应用,以及如何进行细胞类型注释和轨迹推断(Trajectory Inference)。我们将探讨如何利用scRNA-seq的结果来指导流式分析中的抗体选择和目标细胞群的设定。 3. 多组学整合(Multi-omics Integration): 介绍CITE-seq(将抗体-标签与RNA测序结合)和Cellular Hashing等技术,它们弥合了蛋白质表达(流式分析的强项)与基因表达(测序的强项)之间的鸿沟。 第三章:高内涵筛选(High-Content Screening, HCS)与自动化成像 HCS技术利用自动化显微镜和复杂的图像分析软件,实现对大量细胞或组织样本的形态学、分子表达和功能指标的自动化定量测量。 1. 成像平台的构建: 讨论自动对焦、多波长成像和高通量移板系统的技术细节。 2. 特征提取与定量指标: 阐述如何从原始图像中提取数百个生物学相关的定量特征(如核面积、荧光强度分布、细胞骨架形态变化等),并将其转化为可统计的指标。 3. 高通量功能性测定: 介绍如何利用HCS进行药物筛选和毒性评估,尤其是在评估细胞凋亡、自噬或细胞周期阻滞等形态学指标时的优势。 --- 第三部分:生物物理分析与细胞动力学研究 精确测量细胞的物理特性,如力学性质、电生理活动和膜电位变化,对于理解细胞的活化状态和病理过程至关重要。 第四章:细胞力学分析:原子力显微镜(AFM)与实时细胞牵引力显微镜(TFM) 细胞的刚度、粘附力和迁移能力是其功能状态的重要物理标志。 1. 原子力显微镜(AFM)在活细胞研究中的应用: 介绍AFM如何用于测量单个细胞膜的局部弹性模量(Young's Modulus),并探讨癌细胞、干细胞与正常细胞在机械特性上的差异。 2. 细胞牵引力显微镜(Traction Force Microscopy, TFM): 详细阐述TFM原理,即通过测量细胞对附着基底产生的力,来量化肌动蛋白细胞骨架的驱动力。重点分析在不同培养基质刚度下,细胞迁移和信号传导的机械耦合机制。 第五章:钙信号与膜电位成像技术 细胞内信号转导中的关键第二信使——钙离子,以及细胞膜电位的变化,是快速、动态事件的指示器。 1. 荧光探针与实时成像: 介绍新一代高灵敏度、高特异性的钙离子指示剂(如Fura-2、Fluo-4衍生物)以及膜电位敏感染料(如Di-8-ANEPPS)。 2. 共聚焦与两光子显微镜下的时空追踪: 探讨如何使用高速共聚焦系统或两光子显微镜对数分钟甚至数小时内的钙瞬变进行高时间分辨率记录,并结合细胞激活剂或抑制剂来解析信号通路。 3. 电生理学基础(Electrophysiology): 简要介绍膜片钳技术(Patch Clamp)作为“金标准”,如何用于精确测量离子通道的电流和细胞的整体电生理特性,并讨论其与荧光成像数据的互补性。 --- 结语:多技术融合的未来图景 本书强调,现代细胞生物学研究已不再依赖单一技术。高维度的信息获取需要将高通量的筛选能力、纳米级的空间分辨率和实时的功能动态监测相结合。通过系统学习和掌握上述技术,研究人员能够更全面、更深入地理解细胞的复杂生物学行为,从而加速从基础发现到临床转化的进程。这些技术共同构建了一个强大的工具箱,用以应对二十一世纪生物医学面临的重大挑战。
这本书的理论深度和广度都令我印象深刻,作者在阐述流式细胞术的基本物理原理时,没有停留在表面的光电效应介绍,而是深入挖掘了激光散射的几何光学基础,这一点对于想真正理解数据背后的科学逻辑的人来说,是巨大的加分项。特别是关于荧光染料选择、激发波长匹配以及光路设计与补偿的章节,讲解得极其细致入微,仿佛是跟着一位经验丰富的老教授在实验室里进行一对一的指导。然而,我发现其在数据分析和高级应用(比如细胞周期分析、凋亡检测等)的案例深度上,似乎略显保守和传统。当前最新的高参数分析技术,例如CybTOF或者多激光联合应用的高维数据降维处理方法,书中的着墨不多,这让期望紧跟技术前沿的研究者可能需要查阅更多最新的期刊文献来补充这部分内容。总的来说,它为打下坚实的理论基础提供了无可挑剔的支撑,但对于“尖端”的实践指导,尚有提升空间。