內容簡介
植物生理學綜閤性和設計性實驗教程主要介紹植物生理學實驗基礎、植物生理學綜閤性和設計性實驗概述,以及熱激誘導的玉米幼苗耐熱性觀察及其生理生化機製、氣孔運動中的信號交談、煙草懸浮細胞培養體係的建立及其原生質體培養和高等植物葉綠體及其色素等實驗技術,將54個基礎性實驗通過不同的主題串聯成綜閤性實驗,並附有42個設計性實驗選題。
本書介紹的這些實驗方法,既可以獨立開設基礎性實驗,也可以圍繞相關主題開設綜閤性和設計性實驗。本書可作為高等院校生物科學、應用生物科學、生物技術等本科生教材和相關學科教學和研究人員的參考書。
目錄
第1章植物生理學實驗基礎(1)
1.1植物生理學實驗守則(1)
1.2植物生理學實驗中常用儀器使用方法簡介(2)
1.3化學試劑規格的劃分及配製方法(23)
1.4實驗材料的采集、處理與保存(25)
1.5實驗數據的處理(28)
第2章植物生理學綜閤性和設計性實驗概述(31)
2.1綜閤性和設計性實驗的概念與特點(31)
2.2開設綜閤性和設計性實驗的意義(31)
2.3綜閤性和設計性實驗選題引導(32)
2.4綜閤性和設計性實驗方案確立與實施(33)
2.5綜閤性和設計性實驗的教學方法(33)
2.6綜閤性和設計性實驗的考核方法(34)
2.7綜閤性和設計性實驗科技論文寫作方法簡介(36)
第3章熱激誘導的玉米幼苗耐熱性觀察及其生理生化機製(48)
3.1實驗背景(48)
3.2實驗目的(48)
3.3植物材料的培養和處理(49)
實驗1種子發芽率的測定(紅墨水染色法和TTC法)(49)
實驗2種子的萌發和幼苗傷害率與存活率的測定(50)
3.4熱激對玉米幼苗耐熱性的影響(51)
實驗3組織活力的測定(TTC法)(51)
實驗4細胞質膜透性的檢測(電導儀法)(52)
實驗5生物膜過氧化程度的鑒定(丙二醛法)(53)
3.5抗氧化係統在熱激誘導玉米幼苗耐熱性形成中的作用(55)
實驗6過氧化氫酶(CAT)活性的測定(紫外吸收法)(55)
實驗7超氧化物歧化酶(SOD)活性的測定(NBT法)(56)
實驗8抗壞血酸過氧化物酶(APX)活性的測定(紫外吸收法)(58)
實驗9過氧化物酶(GPX)活性的測定(愈創木酚法)(59)
實驗10榖胱甘肽還原酶(GR)活性的測定(紫外吸收法)(60)
實驗11抗壞血酸(AsA/DHA)含量的測定(比色法)(61)
實驗12榖胱甘肽(GSH/GSSG)含量的測定(比色法)(62)
實驗13硫化氫(H2S)含量的測定(64)
3.6滲透調節物質在熱激誘導玉米幼苗耐熱性形成中的作用(66)
實驗14脯氨酸(Pro)含量的測定(比色法)(67)
實驗15甜菜堿含量的測定(比色法)(68)
實驗16可溶性糖含量的測定(69)
3.7熱激蛋白在熱激誘導玉米幼苗耐熱性形成中的作用(73)
實驗17可溶性蛋白含量的測定(考馬斯亮藍法)(74)
實驗18熱穩定蛋白(含熱激蛋白)含量的測定(考馬斯亮藍法)(75)
實驗19熱激蛋白質相對分子質量的測定
(SDS�簿郾�烯酰胺凝膠電泳法)(77)
3.8玉米幼苗在熱激及其後的恢復和高溫脅迫過程中活性氧水平的變化(79)
實驗20過氧化氫含量的測定(79)
實驗21超氧陰離子自由基産生速率的測定(84)
實驗22一氧化氮(NO)含量的測定(87)
3.9玉米幼苗在熱激及其後的高溫脅迫和恢復過程中鈣調素活性的變化(88)
實驗23磷酸二酯酶的提取和活性測定(88)
實驗24玉米幼苗中CaM活性的測定(89)
3.10玉米幼苗在熱激及其後的恢復和高溫脅迫過程中
質膜NADPH氧化酶和H+�睞TPase活性的變化(91)
實驗25質膜微囊泡的分離和純化(91)
實驗26質膜NADPH氧化酶活性的測定(XTT比色法)(93)
實驗27質膜H+�睞TPase活性的測定(94)
3.11玉米幼苗在熱激及其後的恢復和高溫脅迫過程中呼吸速率的變化(95)
實驗28用光閤蒸騰作用測定係統測定植物呼吸速率(95)
3.12玉米幼苗在熱激及其後的恢復和高溫脅迫過程中水分狀況的變化(97)
實驗29植物組織水勢和滲透勢的測定(97)
實驗30植物組織中自由水和束縛水含量的測定(102)
3.13玉米幼苗在熱激及其後的恢復和高溫脅迫過程中
苯丙氨酸解氨酶和脂氧閤酶活性的變化(104)
實驗31苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的測定(104)
實驗32脂氧閤酶(LOX)活性的測定(105)
3.14玉米幼苗在熱激及其後的恢復和高溫脅迫
過程中ABA水平的變化(106)
實驗33酶聯免疫吸附測定法測定脫落酸含量(106)
3.15本章設計性實驗選題(109)
第4章氣孔運動中的信號交談(115)
4.1實驗背景(115)
4.2實驗目的(115)
4.3實驗材料的培養和處理(115)
4.4光照和鉀離子對氣孔開度的影響(115)
實驗34光照對氣孔開度的影響(115)
實驗35鉀離子對氣孔開度的影響(116)
4.5鈣信使係統對氣孔運動的影響(117)
實驗36Ca2+對氣孔開度的影響(117)
實驗37CaM對氣孔開度的影響(118)
4.6活性氧對氣孔運動的影響(119)
實驗38H2O2對氣孔運動的影響(119)
實驗39NO對氣孔運動的影響(119)
4.7植物激素對氣孔運動的影響(120)
實驗40ABA對氣孔運動的影響(120)
實驗41茉莉酸(JA)和水楊酸(SA)對氣孔運動的影響(121)
實驗42硫化氫(H2S)對氣孔運動的影響(122)
4.8本章設計性實驗選題(122)
第5章煙草懸浮細胞培養體係的建立和原生質體培養(125)
5.1實驗背景(125)
5.2實驗目的(125)
5.3煙草植株的培養(125)
5.4愈傷組織的誘導和懸浮培養細胞的建立(126)
實驗43愈傷組織的誘導(126)
實驗44愈傷組織繼代培養和懸浮培養細胞的建立(129)
實驗45懸浮培養細胞存活率的測定(顯微計數法)(130)
實驗46懸浮培養細胞存活率的測定(分光光度法)(131)
實驗47懸浮培養細胞活力的測定(TTC法)(132)
實驗48懸浮培養細胞滲透勢的測定(質壁分離法)(132)
實驗49原生質體培養與融閤(133)
實驗50原生質體活力的測定(FDA染色法)(135)
5.5本章設計性實驗選題(136)
第6章高等植物葉綠體及其色素(139)
6.1實驗背景(139)
6.2實驗目的(139)
6.3葉綠體色素理化性質及含量的測定(139)
實驗51光閤色素的提取和理化性質(139)
實驗52光閤色素的吸收光譜的測定(141)
實驗53光閤色素含量的測定(142)
實驗54葉綠體光誘導熒光強度的測定(144)
6.4本章設計性實驗選題(146)
附錄(148)
附錄A硫酸銨飽和度常用錶(148)
附錄B實驗中常用酸、堿的相對密度和濃度的關係(150)
附錄C常用固態酸、堿、鹽的物質的量濃度配製參考錶(150)
附錄D常用有機溶劑及其主要性質(151)
附錄E常用酸、堿指示劑(153)
附錄F標準計量單位(154)
附錄G常見的植物生長調節物質及其主要性質(156)
附錄H植物激素與生長調節劑在農業生産中的應用(157)
附錄I維生素及其主要性質(159)
附錄J常用緩衝溶液的配製(160)
前言/序言
植物生理學是研究植物生命活動規律及與環境相互關係的科學,是生物學領域中實驗性較強的學科。在深化高等教育改革的今天,對實驗教學提齣瞭更高層次的要求,教學目標從傳統的“驗證理論,培養動手能力和多種實驗技能”嚮“培養創新思維、創新能力和科研能力”轉變。但長期以來,植物生理學實驗多以驗證理論和培養基本實驗技能的驗證性實驗為主,培養學生綜閤能力與創新能力的綜閤性和設計性實驗較少,在一定程度上製約瞭學生能力的提高。為適應21世紀我國高等教育改革和發展的需要,培養具有創新能力和實踐能力的生物學教學與研究人纔,多年來,針對我校植物生理學實驗課程的培養目標和學科特點,我們把科研成果轉化為綜閤性和設計性實驗內容,在植物生理學實驗教學中進行瞭綜閤性和設計性實驗教學改革與實踐,研究成果分彆在2008年和2009年獲得雲南師範大學教學成果一等奬和雲南省教學成果二等奬。在此基礎上,通過參閱國內外相關課程的最新研究成果,編寫瞭。
本書在介紹“植物生理學實驗基礎”和“植物生理學綜閤性和設計性實驗概述”的基礎上,以植物逆境生理章節中“熱激誘導的玉米幼苗耐熱性觀察及其生理生化機製”、水分代謝和信號傳導章節中“氣孔運動中的信號交談”、植物生長發育章節中“煙草懸浮細胞培養體係的建立和原生質體培養”和光閤作用章節中“高等植物葉綠體及其色素”四條主綫為綫索,將植物生理學中的54個基礎性實驗通過不同的主題串聯成綜閤性實驗,每個綜閤性實驗後都配有不同的設計性實驗選題。這些實驗方法,既可以獨立開設基礎性實驗,也可以圍繞相關主題開設綜閤性和設計性實驗。本書是既體現綜閤性和設計性,又具有靈活性的實驗教材。本書可作為師範院校生物科學、應用生物科學、生物技術等本科生教材和相關學科研究人員的參考書
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