發表於2024-12-21
F.M.奧斯伯、R.布倫特、R.E.金斯頓、D.D.穆爾 、J.G.塞德曼等主編的《精編分子生物學實驗指南( 第5版上下)》是知名度很高、不斷*新的《Current Protocols in Molecular Biology》係列的精編版 本。新版對原有內容進行瞭修訂和*新,包括:大腸 杆菌、質粒和噬菌體,DNA的製備和分析,DNA和RNA 的酶學操作,RNA的製備和分析,重組DNA文庫的構建 ,重組DNA文庫的篩選,DNA序列測定,剋隆化DNA的 誘變,DNA導入哺乳動物細胞,蛋白質分析,免疫學 ,DNA-蛋白質相互作用,釀酒酵母,原位雜交和免疫 組織化學,聚閤酶鏈反應,蛋白質的錶達,蛋白質磷 酸化的分析,生物信息學,蛋白質相互作用的分析等 ;又新增瞭染色質的裝配與分析,核酸陣列,組閤文 庫的建立和使用,單個細胞或一群細胞間差異錶達基 因的發現和分析四章內容。
本書可供高等院校和科研機構從事分子生物學研 究的科研工作者和研究生參考。
譯者序
前言
**章 大腸杆菌、質粒和噬菌體
1.1 培養基的製備及細菌學工具
1.1.1 極限培養基
1.1.2 豐富培養基
1.1.3 固體培養基
1.1.4 實驗工具
1.2 在液體培養基中培養
1.2.1 基本方案1 過夜培養
1.2.2 基本方案2 大體積培養
1.2.3 基本方案3 利用計數闆監測生長情況
1.2.4 基本方案4 利用分光光度計監測生長情況
1.3 固體培養基上培養
1.3.1 基本方案1 通過連續稀釋法滴定和分離細菌菌落
1.3.2 基本方案2 通過平闆劃綫法分離單菌落
1.3.3 基本方案3 通過鋪平闆分離單個菌落
1.3.4 基本方案4 影印平闆
1.3.5 輔助方案菌株的保存和復蘇
1.4 經典細菌遺傳學選論
1.5 質粒載體
質粒載體的選擇
1.6 質粒DNA的小量製備
1.6.1 基本方案1 堿裂解小量製備
1.6.2 備選方案 96孔微量滴定闆堿裂解法
1.6.3 基本方案2 煮沸小量製備法
1.7 質粒DNA的大量製備
1.7.1 基本方案1 堿裂解法製備粗製裂解物
1.7.2 基本方案2 氯化銫/溴化乙錠平衡離心法
1.7.3 備擇方案 利用陰離子交換層析或分子篩層析純化質粒DNA
1.8 將質粒DNA導入細菌細胞
1.8.1 基本方案1 CaCl2轉化法
1.8.2 備擇方案 一步法製備和轉化感受態細菌
1.8.3 基本方案2 高效率的電轉化方法
1.9 入噬菌體概述
1.9.1 裂解性生長
1.9.2 溶源性生長
1.10 作為剋隆載體的入噬菌體
1.10.1 用入噬菌體的優點
1.10.2 選擇插入的DNA
1.10.3 入噬菌體來源的剋隆載體的圖譜
1.11 入噬菌體鋪平闆産生噬斑
1.11.1 基本方案1 通過連續稀釋法分離單個噬斑
1.11.2 基本方案2 噬菌體轉染和體外包裝構建
1.12 培養入衍生的噬菌體載體
1.12.1 基本方案 通過平闆裂解製備噬菌體庫
1.12.2 備擇方案 製備液體裂解物
1.13 從噬菌體裂解液中製備入DNA
基本方案 通過分級平衡梯度離心製備DNA
1.14 源於絲狀噬菌體的載體
1.15 利用M13噬菌體衍生載體製備單鏈DNA
基本方案 利用輔助噬菌體從質粒製備單鏈DNA
第2章 DNA的製備和分析
電泳及其應用
凝膠和電路
2.1 水溶液中DNA的純化和濃縮
2.1.1 基本方案 DNA的酚抽提和乙醇沉澱
2.1.2 備擇方案1 異丙醇沉澱DNA
2.1.3 輔助方案1 丁醇濃縮DNA
2.1.4 輔助方案2 醚抽提法去除殘存酚、氯仿或丁醇
2.1.5 備擇方案2 矽膜離心柱法純化DNA
2.1.6 備擇方案3 RNA及DNA稀溶液的純化和濃縮
2.1.7 備擇方案4 乙醇沉澱法去除低分子質量的寡核苷酸和核苷三磷酸
2.2 陰離子交換色譜法純化DNA
基本方案
2.3 從哺乳動物組織中製備基因組DNA
基本方案
2.4 從植物組織中製備基因組DNA
2.4.1 基本方案 氯化銫離心法製備植物DNA
2.4.2 備擇方案 CTAB製備植物DNA
2.5 從細菌中製備基因組DNA
2.5.1 基本方案 細菌基因組DNA的小量製備
2.5.2 備擇方案 氯化銫法大規模製備細菌基因組DNA
……
第3章 DNA和RNA的酶學操作
第4章 RNA的製備和分析
第5章 重組DNA文庫的構建
第6章 重組DNA文庫的篩選
第7章 DNA序列測定
第8章 剋隆化DNA的誘變
第9章 DNA導入哺乳動物細胞
**0章 蛋白質分析
**1章 免疫學
**2章 DNA-蛋白質相互作用
**3章 釀酒酵母
**4章 原位雜交和免疫組織化學
**5章 聚閤酶鏈反應(PCR)
**6章 蛋白質的錶達
**7章 蛋白質磷酸化的分析
**8章 生物信息學
**9章 蛋白質相互作用的分析
第20章 染色質的裝配與分析
第21章 核酸陣列
第22章 組閤文庫的建立和使用
第23章 單個細胞或一群細胞間差異錶達基因的發現和分析
附錄
索引
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