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陈松林，秦启伟 著

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店铺： 科学出版社旗舰店

出版社： 科学出版社

ISBN：9787030302847

商品编码：1262471982

包装：平装

出版时间：2014-08-01

页数：300

字数：442000

正文语种：中文

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图书基本信息

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书名：鱼类细胞培养理论与技术
ISBN：9787030302847
著者：陈松林，秦启伟
出版社：科学出版社
POD版定价：168元
正文语言：中文
装帧：平装
开本：16
页数：300
字数：442000

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目录

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《鱼类细胞培养理论与技术》
序
前言
第一章 鱼类细胞培养的历史回顾、研究进展及其发展前景展望
第一节 鱼类细胞培养概述
第二节 鱼类细胞培养历史回顾
第三节 鱼类细胞培养研究进展
第四节 鱼类细胞系的主要用途及其应用领域
第五节 鱼类细胞培养研究前景展望
第二章 鱼类细胞培养的理论
第一节 动物培养细胞的生长过程和特点
第二节 培养细胞的生长方式和类型
第三节 培养细胞生长的条件
第四节 鱼类细胞培养的特点
第三章 鱼类细胞培养的基本技术
第一节 鱼类细胞培养的基本设施和条件
第二节 鱼类细胞培养基种类与基本成分
第三节 鱼类细胞培养方法
第四节 鱼类细胞原代培养方法
第五节 鱼类细胞传代培养方法
第六节 鱼类细胞冷冻保存方法
第四章 鱼类组织细胞培养和细胞系建立各论
第一节 花鲈肝脏细胞系建立与鉴定
第二节 花鲈脾脏细胞系建立与鉴定
第三节 花鲈心脏细胞系建立与鉴定
第四节 花鲈肾脏细胞系建立与鉴定
第五节 半滑舌鳎肝脏细胞系建立与鉴定
第六节 半滑舌鳎心肌细胞系建立与鉴定
第七节 圆斑星鲽肾脏细胞系建立与鉴定
第八节 大菱鲆肾脏细胞系建立与鉴定
第九节 漠斑牙鲆肾脏细胞系建立与鉴定
第十节 赤点石斑鱼脾脏细胞培养与细胞系建立
第十一节 赤点石斑鱼肾脏细胞培养
第十二节 赤点石斑鱼肝脏细胞培养
第十三节 赤点石斑鱼鳔细胞培养
第十四节 赤点石斑鱼吻端细胞系建立与生物学特性
第十五节 中华鲟鳍细胞系建立与生物学特性
第十六节 斑点叉尾鲴肾脏细胞培养
第十七节 匙吻鲟鳍条细胞培养
第十八节 锦鲤鳍条细胞培养
第十九节 中华鲟多种组织细胞培养
第二十节 施氏鲟细胞培养
第二十一节 中华鳖细胞培养
第二十二节 鳜仔鱼细胞系建立及其生物学特性分析
第二十三节 半滑舌鳎精巢细胞系建立与鉴定
第五章 鱼类胚胎细胞培养各论
第一节 牙鲆胚胎细胞系FEC建立及其对病毒敏感性分析
第二节 大菱鲆胚胎细胞系建立与生物学特性分析
第三节 漠斑牙鲆胚胎细胞系建立及其生物学特性分析
第四节 半滑舌鳎胚胎细胞系建立与鉴定
第六章 鱼类胚胎干细胞培养和基因打靶
第一节 花鲈胚胎干细胞系建立及鉴定
第二节 真鲷胚胎干细胞系建立及鉴定
第三节 表达GFP的花鲈胚胎干细胞株的建立
第四节 花鲈胚胎干细胞移植及嵌合体的构建
第五节 鱼类胚胎干细胞和基因打靶研究进展
第七章 鱼类细胞库建立及管理
第一节 鱼类细胞库建立概述
第二节 细胞系的鉴定、入库和日常管理
第三节 细胞库管理信息系统设计和开发
第四节 鱼类细胞培养和冻存中交叉污染的防治策略
附录
图版

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《鱼类细胞培养理论与技术（精）》内容简介 本书旨在为从事鱼类细胞生物学、水产养殖、疾病防治、疫苗开发、生物技术等领域的研究人员、技术人员、研究生及相关从业者提供一套系统、全面的理论知识与实践操作指导。本书内容涵盖鱼类细胞培养的各个环节，从基础理论到前沿技术，力求做到精益求精，为读者提供坚实的理论基础和可靠的操作范本。 第一部分 鱼类细胞培养的基础理论 本部分将深入剖析鱼类细胞培养的理论基石，帮助读者建立起宏观的认知框架。 鱼类细胞的特性与分类：详细介绍鱼类细胞与哺乳动物、昆虫等其他脊椎动物及无脊椎动物细胞在结构、功能、代谢、生长周期等方面的异同。阐述鱼类细胞在形态、分化程度、增殖能力等方面的多样性，并根据其来源（如不同组织器官、不同发育阶段）进行科学分类，为后续的细胞选择和培养策略奠定基础。重点介绍鱼类细胞在某些特定生理条件下（如低温、低氧）表现出的适应性机制。 鱼类细胞培养的基本原理：深入探讨细胞在外环境中的生存与增殖所依赖的核心要素。包括但不限于： 营养需求：详细介绍鱼类细胞维持生命活动和增殖所需的各种营养物质，如氨基酸（必需氨基酸与非必需氨基酸）、维生素（水溶性与脂溶性）、无机盐（钠、钾、钙、镁、磷等离子的重要性及维持细胞内外渗透压和离子平衡的作用）、葡萄糖（主要的能量来源）等。分析不同细胞类型、不同生长状态对营养物质需求的差异性，以及如何通过优化培养基配方来满足这些需求。 环境因子：深入阐述pH值、渗透压、温度、气体（氧气、二氧化碳）等环境因子对鱼类细胞生长和存活的关键影响。详细介绍维持适宜pH值的缓冲系统（如碳酸氢盐-CO2系统）的工作原理，不同鱼类物种对温度的敏感性及最佳培养温度范围，以及细胞呼吸作用所需的氧气供应与二氧化碳排除的机制。 细胞外基质（ECM）与细胞粘附：讲解ECM在细胞生长、分化、迁移等过程中的重要作用，包括其基本组成（胶原蛋白、层粘连蛋白、纤连蛋白等）和功能。介绍细胞表面受体（如整合素）如何与ECM相互作用，介导细胞与细胞外环境的连接，以及选择合适的细胞培养基质（如聚L-赖氨酸、层粘连蛋白包被的培养器皿）对于促进细胞贴壁和生长的重要性。 细胞信号传导：概述鱼类细胞在体外环境中如何感知和响应信号分子，维持正常的生理功能。介绍细胞生长因子、激素、细胞因子等信号分子在调节细胞增殖、分化、凋亡等过程中的作用，以及信号转导通路（如MAPK通路、PI3K/Akt通路）的基本原理。 细胞培养基的组成与选择：详细介绍各种细胞培养基的组分及其功能，包括基础培养基（如MEM、DMEM、RPMI 1640等）的选择依据，血清（如胎牛血清、马血清、鱼血清）的添加及其作用（提供生长因子、激素、营养物质，维持渗透压等），以及添加物的选择（如抗生素、抗真菌剂、L-谷氨酰胺、丙酮酸钠等）与合理用量。重点介绍针对鱼类细胞培养特点优化的培养基配方，以及无血清培养基、化学成分限定培养基的开发与应用前景。 无菌操作技术：强调无菌操作在细胞培养中的极端重要性，详细介绍无菌操作的原则、方法和注意事项。包括在超净工作台内的操作规范、灭菌方法（如高压灭菌、过滤灭菌）、消毒剂的选择与使用、人员防护、器皿处理、培养基的制备与储存等。通过图文并茂的方式，演示正确操作步骤，降低污染风险。 第二部分 鱼类细胞的制备与培养 本部分将指导读者如何从鱼体组织中分离、获得并维持活力的鱼类细胞。 鱼类细胞系的建立与维持： 细胞系的定义与分类：区分原代细胞培养、传代细胞系、永生化细胞系等概念。介绍鱼类细胞系的优势，如易于标准化、可大量扩增、重复性好等。 细胞系的建立方法：详细介绍从鱼体组织中分离细胞的常用方法，包括酶解法（使用胰蛋白酶、胶原酶、透明质酸酶等）、组织块培养法、机械分散法等。重点阐述选择合适组织来源（如鳃、肝脏、肾脏、肿瘤组织等）、酶解液配制与优化、消化时间和温度的控制、细胞收集与清洗步骤。 细胞系的鉴定与表征：介绍常用的细胞鉴定技术，如形态学观察、免疫细胞化学染色（如特定蛋白标志物的检测）、DNA指纹分析、核型分析等，以确认细胞系的来源、纯度及稳定性。 细胞系的传代与扩增：详细介绍细胞传代（subculture）的原理、方法、周期以及最优传代比例。阐述如何根据细胞生长状态（如汇合度）和细胞特性（如生长速率）确定合适的传代时机。介绍批量培养、滚瓶培养、生物反应器等不同规模的细胞扩增策略。 细胞系的冻存与复苏：讲解细胞冻存的原理（保护细胞免受冰晶损伤和溶质毒性）和关键步骤，包括选择合适的冻存液（如含DMSO的培养基）、控制降温速率、选择合适的冻存容器（如冻存管）以及长期储存条件（如液氮）。详细介绍细胞复苏的流程，包括快速复温、离心、清洗、重新培养等，以及影响复苏效率的因素。 鱼类原代细胞的分离与培养： 组织选择与采集：指导读者如何根据研究目的选择最合适的鱼体组织作为细胞来源，并提供规范的组织采集和处理流程，包括麻醉、消毒、无菌取样、组织清洗、去除污染物等。 酶解消化：详细介绍不同酶解消化液的配方（酶的种类、浓度、缓冲液、添加剂等），酶解时间、温度的优化，以及如何通过反复消化和离心来提高细胞回收率和纯度。 细胞分离与纯化：介绍细胞过滤、密度梯度离心等方法用于去除组织碎片、死亡细胞和杂质，获得高纯度的原代细胞悬液。 原代细胞培养：描述原代细胞接种、培养基选择、培养条件设定（温度、湿度、气体）等关键环节。强调原代细胞的有限传代特性，以及如何在有限的次数内完成研究。 鱼类细胞培养的常用设备与耗材：详细介绍细胞培养实验室必备的设备，如超净工作台（生物安全柜）、CO2培养箱、显微镜（倒置显微镜、荧光显微镜）、离心机、冰箱、超低温冰箱、水浴锅、移液器等，并说明其功能和使用注意事项。同时，列举常用的细胞培养耗材，如培养皿、培养瓶、多孔板、离心管、移液管、针头、过滤器等，并强调其质量和无菌要求。 第三部分 鱼类细胞培养的高级技术与应用 本部分将聚焦于鱼类细胞培养的前沿技术及其在不同领域的广泛应用。 鱼类细胞的生物学特性分析： 细胞增殖与毒性检测：介绍MTT法、CCK-8法、EdU标记法、流式细胞术（细胞周期分析）等检测细胞增殖能力的方法。阐述如何通过这些方法评估药物、环境因子或生物制剂对鱼类细胞的毒性作用。 细胞凋亡检测：详细介绍Annexin V-FITC/PI双染法、TUNEL法、Western Blot检测凋亡相关蛋白（如caspase-3）等检测细胞凋亡的方法。 细胞代谢分析：介绍检测细胞呼吸代谢（如ROS产生、ATP含量）和糖酵解代谢（如乳酸生成）的技术。 细胞免疫荧光与共聚焦显微镜成像：讲解如何利用免疫荧光技术标记细胞内的特定蛋白，并通过共聚焦显微镜进行高分辨率的三维成像，研究蛋白定位、相互作用等。 鱼类病毒与细菌的细胞培养： 病毒分离与鉴定：介绍如何利用鱼类细胞系作为敏感宿主，分离和增殖鱼类病毒。详细描述病毒感染细胞的观察方法（如细胞病变效应CPE），以及病毒滴定（TCID50法）、病毒基因组扩增（PCR、RT-PCR）等鉴定技术。 细菌在细胞内的感染与生存研究：介绍如何利用鱼类细胞模型研究病原性细菌在细胞内的定植、侵入、复制和逃逸宿主免疫的机制。 鱼类细胞在疫苗开发中的应用： 灭活疫苗与亚单位疫苗的生产：讲解如何利用鱼类细胞大量生产病毒或细菌的灭活株或亚单位抗原，为疫苗生产提供原材料。 活载体疫苗与基因工程疫苗的开发：介绍利用鱼类细胞构建和评估活载体疫苗（如重组病毒、重组细菌）的安全性与免疫原性。阐述基因疫苗在鱼类细胞中的表达和免疫诱导机制。 鱼类细胞在基因工程与生物技术中的应用： 基因转染与稳定细胞株的构建：详细介绍多种基因转染技术，包括物理法（电穿孔、显微注射）、化学法（脂质体、聚合物）和生物法（病毒载体）。阐述如何构建稳定表达外源基因的鱼类细胞系，用于蛋白质表达、基因功能研究等。 基因编辑技术在鱼类细胞中的应用：介绍CRISPR/Cas9等基因编辑技术在鱼类细胞中的应用，用于基因敲除、基因敲入，研究基因功能，以及培育具有特定性状的转基因鱼类细胞模型。 细胞模型在疾病研究中的应用：介绍如何利用特定鱼类细胞模型模拟鱼类疾病发生发展的过程，用于病理机制研究、药物筛选和治疗方案评估。 鱼类细胞在环境毒理学研究中的应用： 评估污染物对鱼类细胞的毒性效应：利用鱼类细胞建立体外毒性评价体系，检测和评估环境污染物（如农药、重金属、内分泌干扰物）对鱼类细胞的生长、代谢、生殖、基因表达等方面的影响。 生物修复与环境监测：探讨利用鱼类细胞作为生物传感器，监测水体环境中的污染物。 鱼类细胞培养的质量控制与优化： 细胞培养的标准化：强调建立标准化操作流程（SOP），确保实验的可重复性和结果的可靠性。 污染的预防与处理：总结常见的细胞污染源，提供有效的预防措施，并介绍污染发生后的鉴定与处理方法。 培养基的优化与创新：探讨如何根据不同研究需求，对培养基进行进一步的优化和改进，例如开发新型的生长因子组合、设计特殊的缓冲系统等，以提高细胞的生长效率和特异性。 本书在内容编排上，力求逻辑清晰，循序渐进，既有理论深度，又不乏实践指导。大量引用最新的研究进展和技术方法，并结合实际操作中的常见问题，提供了详细的解决方案。希望本书能够成为鱼类细胞培养领域研究人员不可或缺的参考工具，推动相关学科的发展。

评分☆☆☆☆☆

对于任何一个从事水产养殖或模式生物研究的同行而言，这本书的深度和广度都无法满足当前的学术要求。我特别关注了关于特定经济鱼类如罗非鱼或大黄鱼的细胞系建立的章节，期待能看到针对这些物种特有生理机制的优化方案。然而，这些内容写得极其保守，很多地方只是照搬了几十年前的初步报道，完全没有体现出近二十年来我国在水产生物工程领域取得的巨大进步。例如，当前解决鱼类细胞系对血清依赖性的研究热点——重组生长因子和化学成分确定培养基的开发，这本书里寥寥数语，像是应付差事。它似乎完全忽略了细胞培养技术不仅仅是服务于基础生物学研究，更是推动疫苗开发、疾病诊断和基因工程育种的核心工具这一事实。一本专业的参考书，理应肩负起梳理前沿进展、指导产业升级的重任，而这本书却像一个沉睡在旧时代的文物，固守着过时的知识体系，对于推动行业进步毫无助益。这种停滞不前的知识结构，是其最大的硬伤。

评分☆☆☆☆☆

我花了整整一个下午试图从这本书里找出一些能够指导我实验室日常操作的“干货”，但结果令我大失所望。这本书的语言风格极其晦涩和书面化，大量的描述性文字堆砌在一起，缺乏清晰的逻辑脉络和操作步骤分解。比如，在介绍某个关键的酶解步骤时，作者只是用了一整段话来描述其“历史渊源”和“理论基础”，而真正指导如何根据不同组织类型调整酶的浓度、反应时间和温度的参数表格或流程图，却缺失得令人发指。这对于需要快速解决问题的实验人员来说，简直是效率的巨大障碍。我不得不反复对照其他网络资源和国际期刊的SOP（标准操作规程）来反推这本书里含糊不清的描述。更令人恼火的是，书中引用的参考文献大多陈旧不堪，很多甚至无法在现代学术数据库中查到原始出处，让人怀疑作者的文献溯源工作是否严谨。这本书给我的感觉，更像是一本“研究者写给其他研究者看”的、充满了个人经验总结的笔记合集，而不是一本面向广大专业技术人员的、具有普遍指导意义的教材或参考手册。如果初学者依赖它来入门，恐怕会走不少弯路，甚至因为操作失误而浪费宝贵的实验材料。

评分☆☆☆☆☆

说实话，这本书带给我最强烈的感受是“过时”和“不实用”。我翻阅了好几页关于细胞传代操作的部分，发现它推荐的胰酶消化时间过长，且对后续的血清失活和重悬步骤的细节描述模糊，完全没有考虑到现代细胞系对机械损伤和酶解暴露时间更为敏感的特性。在实际操作中，按照书中的建议，我几乎可以断定会造成大量的细胞死亡或活力下降。这本书更像是一本为二十年前的研究生准备的入门读物，它详尽地描述了什么是细胞，但对于如何让这些细胞在现代实验室环境中高效、稳定地存活和增殖，却给不出任何具有前瞻性的指导。我希望买到的是一本能够帮助我优化实验流程、提高产出效率的工具书，而不是一本堆砌着基本定义和早期实验记录的文献汇编。如果作者或出版方真的希望这本书能够服务于当下的科研人员，至少需要进行一次彻底的、由一线资深专家主导的、侧重于技术革新的深度修订，否则它只能继续被束之高阁，成为实验室书架上一个昂贵的“摆设”。

评分☆☆☆☆☆

这本书的“精装”名副其实，纸张和装帧质量确实不错，但内容的质量却与之形成了鲜明的反差。从内容组织来看，逻辑跳跃性非常强，章节之间的衔接很不自然，仿佛是不同时期、不同作者的零散笔记强行拼凑在一起。例如，前一章还在详细讨论无菌操作台的清洁流程，紧接着下一章就跳跃到复杂的病毒载体构建原理，中间缺乏必要的过渡和基础知识回顾。这种结构使得读者很难建立起一个系统的认知框架。初次接触细胞培养的人，可能会被这种混乱的知识流打乱学习节奏，感到无所适从。此外，书中对于图片和图表的质量也令人担忧。很多流程图模糊不清，分辨率极低，甚至有些关键的电镜照片和免疫荧光结果图标注错误，这在生物学专业书籍中是绝对不可接受的失误。这些低级错误不仅影响了知识的准确传达，更暴露了出版方在校对和审稿环节的严重疏忽，让人对全书的可靠性产生了根本性的怀疑。

评分☆☆☆☆☆

这本所谓的“精装版”鱼类细胞培养书籍，我拿到手后简直是哭笑不得。首先，从封面设计上就能看出出版方是多么敷衍了事。那种老旧的、毫无美感的排版，让人联想到上世纪八十年代的教科书，实在是对不起“精装”二字。更别提里面的内容，虽然号称是“理论与技术”，但翻开目录，我发现它对现代分子生物学和基因编辑技术在鱼类细胞研究中的应用几乎是只字未提。这对于一个身处前沿科研环境的读者来说，简直是灾难。它似乎还停留在细胞分离和基础培养基配置的层面，对于细胞株建立、永生化技术、或者最新的三维培养体系，介绍得轻描淡写，缺乏深入的探讨和实际案例分析。我本来期待能学到一些高级的无血清培养方案，或者解决培养过程中常见污染问题的独门秘籍，结果全书充满了大量我早就熟知的、过于基础的知识点。感觉就像是把十年前的硕士毕业论文稍作整理就拿出来当新书卖了。如果不是因为单位要求采购特定领域的参考书，我绝对会毫不犹豫地将它退掉。它的价值，可能仅仅停留在对早期细胞培养历史的一个文献回顾，对于实际操作指导意义实在有限，希望能有更与时俱进的替代品出现。