生命科學實驗指南係列：人乾細胞培養 [Culture of Human Stem Cells] 下載 mobi epub pdf 電子書 在線閱讀 2026

內容簡介

　　《生命科學實驗指南係列：人乾細胞培養》是R.IanFreshney主編的特殊細胞培養（Culture of Specialized Cells）係列叢書之一，旨在介紹近年來湧現齣來的諸多乾細胞培養方法中*有效和*靈敏的方法與技術。其中包括乾細胞係的質量控製程序、胚胎乾細胞係的獲取與培養、胚胎乾細胞和胚胎癌細胞的神經分化技術、ES細胞的心肌細胞分化、生殖細胞譜係的培養、胚胎癌乾細胞的獲取和培養、臍帶和臍帶血乾細胞的培養、牙髓中的多能乾細胞、骨髓基質來源的間充質乾／祖細胞的培養原則和鑒定、疏鬆結締組織乾／祖細胞的分離、鑒定和培養、角膜乾細胞的培養、乳腺乾細胞的培養以及脂肪乾細胞的培養。《生命科學實驗指南係列：人乾細胞培養》每章有簡明的導言，介紹背景知識及進展，然後詳盡描述培養方法，其中包括培養基和試劑的準備，有的章節還推薦不同的方案供試用者選擇，因此《生命科學實驗指南係列：人乾細胞培養》具有一定的實用性與時效性。
　　《生命科學實驗指南係列：人乾細胞培養》可供乾細胞知識與應用相關領域的科研人員、臨床醫生、高等院校師生、生物工程人員參考。

內頁插圖

目錄

譯者的話
前言

第1章 乾細胞係的質量控製程序
1．1 導言
1．2 細胞入庫原則
1．3 細胞特性
1．4 無菌
1．5 支原體檢測
1．6 其他微生物汙染和潛在的生物危害
1．7 培養條件、試劑及培養基的質量控製
1．8 結論
參考文獻
附錄1使用Ⅱ類生物安全櫥時的某些注意事項

第2章 人胚胎乾細胞係：衍生與培養
2．1 引言
2．2 細胞培養基成分
2．3 小鼠胚胎飼養細胞（MEF）的製備
2．4 人胚胎乾細胞的誘導
2．5 人胚胎乾細胞的增殖
2．6 hES細胞的凍存
2．7 hES細胞的特性鑒定
2．8 利用hES細胞進行分化研究
2．9 材料來源
參考文獻

第3章 人EC和ES細胞神經分化技術
3．1 引言
3．2 其他方法
3．3 方法的原理和優勢
3．4 培養基和試劑的準備
3．5 細胞培養
3．6 凍存
3．7 分化
3．8 分析
3．9 高通量篩選
3．1 0材料來源
參考文獻

第4章 人胚胎乾細胞嚮心肌細胞的分化
4．1 引言
4．2 方法概述
4．3 培養基與試劑的準備
4．4 hESC分化為心肌細胞的操作方案
4．5 材料來源
參考文獻

第5章 人生殖細胞譜係的培養
5．1 引言
5．2 培養基及試劑配製細則
5．3 細胞培養方法學
5．4 培養物鑒定與特性分析
5．5 人生殖細胞培養物的分化
5．6 凍存
5．7 材料來源
參考文獻

第6章 人胚胎癌（EC）乾細胞係的來源和培養
6．1 背景知識
6．2 試劑的準備
6．3 方案
6．4 特徵
6．5 低溫保存
6．6 材料來源
參考文獻

第7章 臍帶和臍血來源乾細胞的培養
7．1 背景介紹
7．2 培養基和試劑的製備
7．3 具體方案
7．4 臍帶來源細胞的生物學特徵
7．5 材料來源
參考文獻

第8章 牙髓多能乾細胞
8．1 背景介紹
8．2 培養基與試劑的製備
8．3 培養的具體方案
8．4 分化潛能與鑒定
8．5 討論
8．6 材料來源
參考文獻

第9章 骨髓基質來源的間充質乾／祖細胞（MSCs）的培養基本原則和鑒定
9．1 引言
9．2 培養基和試劑的準備
9．3 分離人骨髓細胞用於MSCs擴增
9．4 處理人骨髓細胞用於MSCs培養
9．5 MSCs培養物的擴增和凍存
9．6 鑒定
9．7 附加方案：大鼠MSCs的獲得和擴增
9．8 MSCs擴增技術注釋
9．9 概要和評述
9．1 0材料來源
參考文獻

第10章 軟結締組織乾／祖細胞的分離、鑒定和培養
10．1 研究背景
10．2 培養基和試劑準備
10．3 從正常人和骨關節炎患者的關節軟骨中分離軟骨祖細胞
10．4 從人胎兒軟骨中分離軟骨祖細胞
10．5 從人滑膜中分離祖細胞
10．6 材料來源
參考文獻

第11章 人角膜乾細胞的培養
11．1 概述
11．2 培養基和試劑的配製
11．3 人角膜緣乾細胞（LSC）的培養
11．4 培養人角膜間質乾細胞
11．5 人角膜內皮乾細胞的培養
11．6 小結
11．7 材料和供應商清單
參考文獻

第12章 乳腺乾細胞的培養
12．1 培養乾細胞的必要性
12．2 乳腺乾細胞存在的證據
12．3 乳腺細胞培養基的組成
12．4 乳腺乾細胞培養模式
12．5 結果矛盾還是數據不同
12．6 結論
12．7 材料來源
參考文獻

第13章 脂肪來源乾細胞的組織培養
13．1 背景知識
13．2 培養基和試劑的準備
13．3 取材和細胞分離
13．4 脂肪乾細胞培養和擴增
13．5 ASCs的特徵及分化
13．6 材料來源
參考文獻
縮略語
索引

前言/序言

　　在過去的幾年中，由於對人乾細胞的研究興趣激增，開闢瞭一個探索從最早期的細胞到功能充分分化的細胞（諸如神經元、心肌細胞以及如骨和軟骨這種堅硬組織的細胞）的分化調控領域。這不僅為研究調控機製提供瞭模型，而且也為組織修復所需的工程生産閤適的移植物創造瞭有意義的機會。胚胎乾細胞、從臍帶和牙胚（toothgerm）獲得的乾細胞、從骨髓和其他部位獲得的成體乾細胞均為異體移植物或自體移植物提供瞭潛在的源泉。有關乾細胞的特性、乾細胞識彆標誌的探討，以及伴隨正常乾細胞和胚胎癌分化錶型錶達的標誌錶達調控改變已有不少論述。本書的目的在於直接介紹乾細胞培養的方法學和其特性。雖然其中的不少技術仍處於發展階段，但現仍有眾多的已建立的技術需要介紹給湧人乾細胞研究領域的研究者們。
　　本書遵循以前Cultureo廠SpecializedCells係列叢書的傳統方式撰寫，在來自胚胎的、新生的、成體的組織中的眾多乾細胞中，隻描述有限的代錶性技術，其重點在於實踐指導。研究者隻要有一定的基礎，在沒有原始文獻來源或其他齣版物的情況下，仍應有可能按本書方案進行實驗。因此本書提供的是一種適閤的入門性指導，它使得進入該領域的新手們，其中包括基礎科學的和有臨床背景的研究人員，熟悉當前被人們所應用的某些技術方法，以及增進他們在該領域的知識，或者有助於發展他們自己的研究項目。

細胞生物學前沿技術：高級哺乳動物細胞共培養係統構建與應用 本書聚焦於現代細胞生物學和組織工程領域中最具挑戰性與前沿性的研究方嚮之一：復雜三維（3D）多細胞共培養係統的構建、優化與應用。 隨著對生命過程理解的不斷深入，單一細胞係或二維（2D）培養體係已無法完全模擬體內復雜的微環境。本書旨在為高階研究人員、博士研究生以及生物技術專傢提供一套全麵、深入且高度實用的技術藍圖，用以設計和實施能夠重現生理組織結構與功能的先進共培養模型。 核心主題：超越傳統，邁嚮類器官與類器官芯片（Organ-on-a-Chip） 本書將深入探討如何利用先進的生物材料科學、微流控技術與細胞生物學原理，成功構建和維護具備高度生物學相關性的多細胞係統。內容嚴格圍繞共培養體係的設計、實現和數據解讀展開，完全不涉及人乾細胞的特定培養方法、剋隆化技術或特定乾細胞譜係分化路徑的詳細操作規程。 第一部分：復雜共培養係統的理論基礎與設計哲學（約350字） 本部分闡述從2D到3D培養模式轉變的必要性，強調細胞間通訊和基質微環境在決定細胞命運與功能中的關鍵作用。 細胞微環境的動態重塑： 深入分析細胞外基質（ECM）組分（如膠原蛋白、縴連蛋白、層粘連蛋白）在指導細胞形態、極性和功能分化中的信號傳導機製。討論如何通過調整ECM的物理特性（硬度、孔隙率、縴維取嚮）來精確模擬不同器官的機械負荷。 多細胞異質性的重要性： 闡述在腫瘤微環境、免疫屏障或組織修復過程中，不同細胞群體（如基質細胞、內皮細胞、免疫細胞、間充質細胞等）之間信號對話（旁分泌、接觸依賴性）如何驅動整體係統的功能錶現。 模型選擇的決策樹： 提供一套係統的評估框架，幫助研究者根據實驗目的（藥物篩選、疾病建模、再生醫學應用）選擇閤適的共培養策略，包括球形聚集體（Spheroids）、支架介導的3D結構，以及微流控驅動的類器官結構。 第二部分：先進共培養模型的構建與優化（約600字） 本章內容集中於構建不同復雜度的多細胞結構，重點介紹如何實現不同細胞類型的空間排布和功能集成。 水凝膠基質的高級應用： 詳細介紹閤成水凝膠（如PEG、PURA）和天然水凝膠（如I型膠原、甲基縴維素、藻酸鹽）的選擇標準。重點講解通過光聚閤、酶交聯等技術實現水凝膠的時空可控硬化，以適應不同細胞群對機械刺激的差異化需求。 球形聚集體（Spheroids）的精細控製： 探討基於U底闆、磁性微球或懸浮培養技術製備均勻球體的優化方案。特彆關注如何通過控製細胞接種密度和攪拌速率，實現球體內部的營養梯度和缺氧核心的模擬，這是高階組織模型的重要特徵。 類器官構建的工程學挑戰（非乾細胞特定）： 討論在不依賴特定乾細胞起始的情況下，如何通過精確的營養液配比和細胞比例組閤，誘導異質性細胞群自組裝形成具備基本組織結構（如極化上皮層、管腔結構）的類組織體。涉及對關鍵生長因子和抑製劑的劑量響應分析。 共培養中的界麵工程： 詳細解析如何構建模擬血管化或淋巴引流的界麵。包括內皮細胞管形成的原位血管生成技術，以及如何利用特定的基質層分隔或融閤不同功能區的細胞群。 第三部分：集成微流控係統：類器官芯片（Organ-on-a-Chip）的實現（約400字） 本部分深入探討將3D共培養係統集成到微流控芯片平颱上的工程技術，以實現對生理流體動力學和動態環境的模擬。 芯片材料與微加工技術： 比較PDMS、玻璃和生物相容性聚閤物在微流控應用中的優劣。詳細介紹光刻、軟光刻（Soft Lithography）和3D打印技術在製造具有精確通道幾何形狀和孔隙度的芯片結構中的應用。 流體力學與剪切應力的控製： 闡述如何通過精確泵送係統（如蠕動泵、注射泵）提供模擬生理血流速度和湍流的剪切應力。討論如何量化和調控作用於內皮細胞或機械敏感細胞（如成縴維細胞）上的流體力學信號。 多腔室與多模塊集成： 介紹“器官連接體”（Body-on-a-Chip）的概念，即如何通過微通道將不同功能的共培養模塊（例如，肝髒模塊與腎髒模塊）連接起來，模擬藥物的吸收、分布、代謝和排泄（ADME）過程。 第四部分：高級成像、分析與數據解讀（約150字） 本部分側重於對復雜3D共培養係統産生的大量功能性數據的獲取與解釋，強調非破壞性分析技術。 活細胞成像與時間序列分析： 介紹共聚焦顯微鏡（Confocal Microscopy）和雙光子顯微鏡在獲取深度、高分辨率3D圖像時的配置與優化。強調使用熒光探針追蹤細胞遷移、藥物滲透和分子事件的時空動態。 高通量功能性指標的評估： 討論如何量化共培養係統的成熟度，包括代謝活性測定（如LDH釋放、ATP生成）、屏障功能測試（跨細胞電阻TEER測量）以及特定組織標誌物的蛋白質組學或基因錶達譜分析。 本書適閤對象： 本書假定讀者已具備紮實的細胞生物學、生物化學基礎知識，並熟悉基本的細胞培養技術。它是為追求在組織工程、藥物開發、基礎生理學研究中引入高保真、高通量、動態化實驗模型的科研工作者量身定製的高階參考資料。通過本書的學習，研究人員將能夠獨立設計並實施復雜的三維多細胞共培養實驗，從而推動生物醫學研究邁嚮新的颱階。